Resultado incorreto de exame PCR para FeLV em gata impede adoção e causa danos

Prezada Marjorie,

Boa noite, me chamo Amanda, médica veterinária, patologista clinica com mais de 12 anos de experiência, pós graduada em patologia clínica e microbiologia clínica e especialista em patologia clínica veterinária, sou responsável técnica pelo laboratório Gold Lab Vet. Estava analisando sua reclamação, nossa interação com a dra. Claudia (veterinária da Ponyo) e o laudo de nosso exame para te prestar os esclarecimentos solicitados. Montei esta resposta em conjunto com a dra. Iracema Carvalho, responsável pelos KITs de PCR da Bioclin, e é bióloga, mestre e PhD em Ciências Biológicas, possui expertise em Biologia Molecular, Microbiologia, Virologia e Imunologia.
Primeiro, gostaria de esclarecer que temos garantia da precisão do resultado de nosso exame, pois fizemos o pcr com a amostra enviada ao Gold por dois métodos distintos:
Sendo o primeiro método o PCR multiplex, onde avaliamos em conjunto tanto o RNA viral do FIV e também do FELV, onde tivemos resultado positivo para FELV;
No segundo método avaliamos isoladamente o RNA viral da FELV, para a confirmação do resultado apresentado no PCR multiplex.
Para a realização desse exame, o PCR detecta regiões diferentes do genoma viral. Esse não é um exame passível de contaminação ou erro/falso positivo. Além disso, todos os nossos PCR são realizados com controle interno (do próprio kit), para termos certeza do controle de qualidade, onde este controle indica se não pode ocorrer erro durante a extração (isolamento do material genético pesquisado), gerando resultados falso positivos/negativos, além dos controles positivos e negativos. Ressalto ainda que realizamos exame de sorologia para FIV/FELV da amostra da PONYO (mesmo não sendo solicitado), onde a sorologia deu resultado NEGATIVO, mesmo resultado dos exames feitos em outro local Motivo dessas investigações adicionais: A dra. Claudia entrou em contato conosco solicitando revisão sobre o resultado do exame, então fizemos controle interno para validação do resultado.
Cito também a própria bula do kit comercial de FIV/FELV:
LIMITAÇÕES DO TESTE
Este produto é destinado para triagem de infecção pelo vírus da imunodeficiência felina (FIV detecção de Anticorpos Anti-vírus) e pelo vírus da leucemia felina (FeLV detecção de Antígeno do vírus). Um resultado não reagente pode ser observado, caso a quantidade de analito presente na amostra seja inferior ao limite de detecção do teste. Isso pode acontecer, dependendo do período da doença em que a amostra foi coletada, tipo de amostra utilizada no teste ou as condições de armazenamento da mesma. Nestes casos, consultar o médico veterinário responsável e considerar a possibilidade de repetir o teste após algumas semanas. Para o diagnóstico da doença, o profissional deve levar em consideração não apenas o resultado deste teste; mas, também os sinais clínicos, condições de saúde do animal e outros resultados de diagnóstico eventualmente disponíveis.

Acrescento:
É possível encontrar animais positivos para o RNA viral e negativos para o antígeno no sangue (uma vez que o PCR é mais sensível que o ELISA). É possível encontrar animais positivos para o antígeno viral e negativos para o RNA (em um contexto de clearance viral o RNA viral é degradado mais rapidamente que a proteína).
Esse animal é sabidamente positivo para o FELV DNA Proviral? É um paciente regressivo para a infecção?
Porque existe outro ponto, também: utilizando sangue total, é sempre possível que esteja sendo detectado o DNA proviral residual durante a análise do FELV RNA. Para minimizar o risco dessa interferência/contaminação o ideal é tratar o material extraído com DNAse OU utilizar amostra de soro/plasma.
O PCR é considerado o exame de maior sensibilidade no diagnóstico de FIV e FELV. Portanto, uma sorologia NEGATIVA, com um PCR POSITIVO, deve-se considerar sempre o PCR como diagnóstico definitivo.

Nosso laudo foi liberado com a seguinte observação:
FeLV
Apesar do PCR ser um teste com alta sensibilidade, resultados falso-negativos podem ser obtidos devido à alta variação na carga antigênica que o FeLV possui, tornando o vírus muitas vezes indetectável. Resultados negativos não significam que o animal não seja portador do vírus, caso a evolução clínica seja compatível com infecção de FelV recomendamos repetir essa análise em 20 dias. Embora a PCR ser um teste com alta sensibilidade, resultados falso-negativos podem ser obtidos quando o material genético na amostra enviada esteja comprometido, armazenamento, tempo decorrido da colheita, quantidade e amostra inadequada são as principais intercorrências de inviabilidade no exame.

O exame de PCR realizado no outro laboratório, foi feito RNA VIRAL? Ou DNA PROVIRAL? Tem os mesmos controles de qualidade que realizamos em nosso laboratório? Respondemos pela qualidade do Gold Lab Vet, não pelo outro laboratório/empresa. Existem maiores chances de dar resultados falso-negativos do que falso-positivos.
O que te leva a crer que o positivo está incorreto e o negativo correto? É dever do guardião/lar temporário/lar especializado em resgate de gatos, monitorar a saúde do pet e principalmente, se tratando de lar de gatos, acompanhar periodicamente, se atualizar com relação a evolução das doenças, informar os tutores e possíveis adotantes sobre as situações em andamento, ciente de que essas doenças não são ciência exata (falando de sua fase e sintomatologia).
Além disso, conforme a literatura médica, a FELV possui algumas fases da doença:
Infecção regressiva - Ocorre a replicação viral nas tonsilas e linfonodos regionais (ROJKO et al., *******), o animal desenvolve resposta imune efetiva contra o vírus e este é eliminado. Não ocorre disseminação sistêmica e a antigenemia/viremia é indetectável (LUTZ et al., *******; TORRES et al., *******). Se o animal não desenvolve imunidade adequada, o vírus é disseminado sistemicamente por linfócitos e monócitos. A antigenemia/viremia é transiente, pois é detectável por cerca de três a seis semanas, ocorrendo completa eliminação do vírus após esse período (LUTZ et al., *******; FLYNN et al., *******; FLYNN et al., *******);
Infecção latente - O animal apresenta antigenemia/viremia por mais de três semanas e ocorre infecção de células da medula óssea (ROJKO et al., *******; HARTMANN, *******). Dentro de meses, o animal desenvolve uma resposta imune capaz de eliminar a antigenemia/viremia, mas o DNA proviral está presente nas células precursoras da medula. Essa fase é identificada apenas por cultivo de células de medula óssea (HARTMANN, *******);
Infecção persistente - Em animais com sistema imune incapaz de eliminar a antigenemia/viremia após 4 a 6 semanas de infecção, ocorre a disseminação viral para tecidos glandulares e epiteliais, incluindo glândulas salivares e as mucosas nasal e faringeal (SPARKES, *******). A infecção desses tecidos permite a eliminação do vírus ao ambiente e a possível transmissão horizontal (HARDY et al., *******; SPARKES, *******). Animais com infecção persistente sucumbem às doenças associadas ao FeLV e a maioria morre dentro de três anos (HARTMANN, *******; LEVY et al., *******).

Com base em todos os dados acima, podemos concluir que a PONYO pode ser sim ser FELV positiva, porém a infecção se encontra na fase REGRESSIVA, onde ela teve o contato com o vírus, o sistema imune dela desenvolveu resposta efetiva para eliminar o vírus, antes dele se replicar sistemicamente.

Um exemplo simples seria:
COVID muitas pessoas tiveram contato com o vírus e desenvolveram a doença, com sintomas desde os mais leves até os mais severos, tudo isso variando conforme a resposta imune do indivíduo. Outros, tiveram contato com o vírus, porém o sistema imune foi capaz de eliminar o vírus antes mesmo dele se replicar no sistema e desenvolver os sintomas da doença.

O mesmo pode ter ocorrido com a PONYO. Infelizmente, biologia não é como matemática. Tudo varia conforme a fase da doença, período da coleta do material, carga viral, entre outros. NENHUM EXAME É *******% SENSÍVEL E *******% ESPECÍFICO.
Sua veterinária entrou em contato com nossa equipe conforme citado acima, discutiu os resultados dos nossos exames e ficou de nos encaminhar posteriormente os resultados dos exames feitos no outro laboratório para seguirmos falando sobre o caso, porém não recebemos os laudos.
Todo seu relato sobre a saúde da Ponyo, cenário e possibilidades de adoção, nos entristece, porém, o papel do laboratório é relatar objetivamente o que é analisado em um diagnóstico, uma fotografia , uma análise do material enviado em um determinado momento na jornada de saúde do paciente. O que fazemos é entregar uma ferramenta de auxílio no fechamento de um diagnóstico e o papel do clínico veterinário responsável é juntar essa ferramenta junto ao quadro clínico, os sintomas apresentados e fechar o quadro.
Cito este artigo como leitura complementar para você entender mais sobre o caso da Ponyo, artigo da ZOETIS: https://**************parte-1-fiv-e-felv#:~:text=Existem%2C%20também%2C%20gatos%20com%20boa%20resposta%20imunológica%2C,DNA%20proviral%20na%20medula%20óssea%20desses%20animais - com destaque na infeção regressiva. Outro artigo, da PREMIER PET, também falando sobre o assunto: https://*******
Conforme os artigos que te destaquei, essa classificação da FELV é relativamente recente, de *******, então pode ser que o lar de resgate felino ou quem lhe passou essas informações, não esteja tão atualizado sobre FELV, o que não significa que erramos ou que a fase da doença não existe. Tudo que você relatou, foi causado pela sua interação com pessoas que poderiam ter lhe dito vamos monitorar mais a saúde da Ponyo e acompanhar com mais exames, ao invés de alegar que ela não teve contato com a FELV.
Fico a sua disposição para esclarecimentos, te convido para conhecer nosso laboratório e entender a seriedade e comprometimento que temos com as vidas que lidamos e lhe ofereço em cortesia um novo exame de PCR para a Ponyo.